中国科学家表示，他们已经开发出一种快速、廉价的方法，可以提供实时监控，以帮助控制淋病奈瑟氏球菌的抗药性（AMR）菌株的传播。该小组在《MolecularDiagnostics》上发表了其研究“MultiplexHigh-ResolutionMeltingAssayforSimultaneousIdentificationofMolecularMarkersAssociatedwithExtended-SpectrumCephalosporinsandAzithromycinResistanceinNeisseriagonorrhoeae”。
“淋病奈瑟菌的抗药性一直是全球公共卫生的一个主要问题。我们开发并评估了一种基于高分辨率熔解（HRM）技术的多重检测方法，它是一种快速、简单、经济有效的方法，可同时检测和识别淋病奈瑟菌中与广谱头孢菌素（ESC）和阿奇霉素（AZM）耐药性相关的不同分子标记物。”调查人员写道。
“选择48株特征良好的淋病奈瑟菌临床分离株进行初步检测。多重HRM分析能够准确识别与ESC和AZM耐药相关的抗菌药物耐药决定因子的不同核苷酸变异。对15株非淋菌菌株进行特异性和交叉反应性检测。然后，该方法在份已用全基因组测序技术测序的存档DNA样本上进行了验证。”
“与全基因组测序相比，这些测定的灵敏度为98.6％，特异性为99.2％。为了进一步验证测定的性能，使用多重HRM测定筛选了个样品（个临床分离株和个临床样品）。结果显示与PCR测序结果具有良好的一致性。”
“淋病奈瑟菌对以前推荐使用的几乎所有种类的抗生素都产生了抗药性，”研究人员说，“及时确定和监测AMR资料对于适当个性化治疗和维持治疗效果至关重要。”
研究人员补充说，目前的监控系统主要依靠基于培养的方法，这种方法灵敏度高，但周转时间长。已经开发了几种核酸扩增检测方法，但它们价格昂贵且不能广泛获得。在过去的几年里，研究团队一直在评估淋球菌AMR的现状和AMR筛查技术的发展。他们设计并开发了一种基于高分辨率熔解（HRM）技术的复合分析方法。
研究人员认为，与其它检测单个基因突变的分子方法相比，HRM技术可以在单个测试中检测出与ESC和AZM耐药相关的最常见突变。它使用实时PCR系统，这是大多数微生物实验室和临床环境中常见的设备。
选择了48个特征明确的淋病奈瑟氏球菌临床标本和15个非淋球菌菌株进行初始测定。多重HRM分析能够准确识别与头孢曲松和阿奇霉素耐药性相关的AMR决定因素的不同核苷酸变异。将例临床分离株和标本的多重HRM测试结果与同一样本的全基因测序和PCR测序结果进行比较。与全基因组测序相比，多重HRM检测AMR决定因素的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为98.6%、99.2%、98.6%和99.2%。结果可在90分钟内获得，每个样品的成本不到1美元。
研究人员说，这种无需测序的HRM分析方法可以应用于大规模的流行病学项目，以加强对ESC和AZM耐药性的监测，并支持对耐药性淋病暴发的实时识别和调查。研究人员继续说，通过应用这种检测方法，淋病菌的AMR监测可以得到显著加强，从而改进管理方案，旨在控制耐药性淋病奈瑟菌株的进一步传播和病原体的根除。
研究人员说：“我们的团队一直致力于淋病AMR现状评估和AMR筛查技术的研发，为淋病的有效防治提供科技支撑。这种快速、简单、廉价的方法可能对资源有限、疾病负担严重的国家产生重大影响。”
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